胰腺特异性表达载体PDX1-eGFP构建及体外验证

• 作者: 冯冲 宋小凤 李娟 杨希祥 潘登科 石宁宁 臧荣鑫 魏静
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰腺特异性表达 PDX1启动子 MIN-6胰岛β细胞 体外验证
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 77-80
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3668字
• 语种: 中文

摘要

为了研究胰腺发育与缺陷的转基因特异性表达系统,探索胰腺特异性表达载体的构建并进行体外验证.以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,小鼠PDX1启动子为特异性启动元件,构建胰腺特异性启动eGFP表达载体PDX1-eGFP,载体转染MIN-6胰岛β细胞和猪耳成纤维细胞,培养48 h后,进行荧光观察和RT-PCR、Western blot检测.结果显示,eGFP在MIN-6胰岛β细胞中的RNA水平和蛋白水平均表达,而在非胰腺细胞猪耳成纤维细胞中均不表达.本研究结果表明,成功获得胰岛特异性表达载体PDX1-eGFP,为构建相关基因在胰腺中特异性表达的载体提供依据,为制备胰腺缺陷动物奠定基础.