胚胎干细胞治疗脊髓损伤的实验研究

• 作者: 刘韬 徐进 曹玉华 朱肖奇 郑璟
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 脊髓损伤 移植 功能恢复
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1031-1036
• 分类号: R651.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13604/j.cnki.46-1064/r.2015.09.01

摘要

目的 探讨未经诱导的胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)移植对SD大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)神经功能恢复的影响.方法 取受孕昆明系小鼠的囊胚进行胚胎干细胞的提取、建系,以流式细胞仪测试阶段特异性胚胎干细胞表面抗原(stage-specific embryonic antigens 1,SSEA-1),进行干性鉴定并进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)染色示踪.将30只SD大鼠制备为T10脊髓损伤模型,将存活的26只大鼠随机分为对照组(A组,8只),只行脊髓损伤手术而不行特殊治疗;生理盐水治疗组(B组,9只),于损伤区域局部注射20 μL生理盐水;细胞治疗组(C组,9只),于损伤区域局部注射20μL标记好的ESCs,总细胞数为2×106个.术后1、2、3、4、5、6周采用BBB后肢运动功能评分观察大鼠神经功能恢复情况,并在第6周取损伤脊髓行病理组织HE染色和免疫组织化学染色观察.结果 ESCs经体外培养,呈典型的“鸟巢”状生长,碱性磷酸酶(alkaline-phosphatase,AKP)染色阳性,SSEA-1表达阳性,并成功标记上5-BrdU.大鼠实验,BBB运动功能评分显示脊髓损伤开始0～1周内,三组大鼠运动功能恢复情况差别无统计学意义(P＞0.05).第2～6周,C组与A、B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).HE染色观察:三组皆有损伤区域内空洞形成及局部细胞坏死,但C组明显较A、B两组小.免疫组化染色观察C组在损伤区域表达双染的神经巢蛋白(Neural nest protein,Nestin)、神经元特异性蛋白(Neuron-specific nuclear protein,NeuN)及神经胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillaryacidic protein,GFAP).结论 将未分化的ESCs局部移植入SCI大鼠体内后,能够分化成神经元及神经胶质细胞,对肢体功能的改善有一定的促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱肖奇		11	58	5.0	7.0
2	郑璟		4	7	1.0	2.0
3	徐进		3	6	1.0	2.0
4	曹玉华		1	1	1.0	1.0
5	刘韬		1	1	1.0	1.0