肿瘤坏死因子-α对RF/6A细胞自噬促进细胞增殖、迁移和管腔形成的影响

• 作者: 常远 李蓉 杜军辉
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 血管生成 视网膜新生血管 炎症 自噬 肿瘤坏死因子α Beclin-1
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1132-1136
• 页数: 5页
• 字数: 6349字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2015.0310

摘要

目的 本研究观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)对体外培养的恒河猴脉络膜/视网膜内皮细胞(RF/6A)表达自噬蛋白Beclin-1及细胞增殖、迁移和管腔形成的影响,探讨TNF-α参与新生血管生成的可能机制.方法 将生长良好的RF/6A细胞随机分为空白对照组、TNF-α组和TNF-α+3-MA组.培养24 h、48 h后采用Western blot检测细胞Beclin-1蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖,细胞划痕法检测细胞迁移,Matrigel法检测管腔形成.结果 培养24 h和48 h,各组Beclin-1/β-actin比值分别是TNF-α组(24 h)0.673±0.017、TNF-α+ 3-MA组(24 h)0.491±0.017、TNF-α组(48 h)0.792±0.006、TNF-α+ 3-MA组(48 h)0.504±0.007、空白对照组0.268±0.017.TNF-α组RF/6A细胞Beclin-1的表达量均明显高于空白对照组(P＜0.05),TNF-α+ 3-MA组Beclin-1的表达量较TNF-α组明显减少(P＜0.05).各组细胞的相对增殖率分别是TNF-α组(24 h)1.410±0.010、TNF-α+ 3-MA组(24 h) 1.290±0.004、TNF-α组(48 h)1.320±0.011、TNF-α+3-MA组(48 h)0.180±0.015、对照组(24 h)1.000±0.020、对照组(48 h) 1.000±0.011;TNF-α组细胞的相对增殖率均较空白对照组升高(P＜0.05),3-MA预处理后,TNF-α促进RF/6A细胞增殖的能力在两个时间点均受到抑制(均为P＜0.05).各组细胞的相对迁移距离分别是TNF-α组(24 h) (345±28) μm、TNF-α+ 3-MA组(24 h) (259±77) μm、TNF-α组(48 h) (762±55) μm、TNF-α+ 3-MA组(48 h)(659±48)μm、空白对照组(24 h)(195±63) μm、空白对照组(48 h)(412±94) μm;TNF-α处理组RF/6A细胞24 h的迁移明显强于对照组(P＜0.05),加入3-MA预处理后,这种增强作用有所下降,但仍然明显高于对照组(P＜0.05);培养48 h,更多细胞迁移入划痕区域,较24 h明显增加;不同组之间的差异与24h时的结果类似,差异有统计学意义(P＜0.05);培养24 h各组细胞管腔形成个数:TNF-α组(11.80±0.81)个、TNF-α+ 3-MA组(7.50±0.72)个、空白对照组(4.30±1.12)个,TNF-α组及TNF-α+3-MA组管腔形成个数均高于对照组(均为P＜0.05),TNF-α+ 3-MA组较TNF-α组明显减少(P＜0.05).结论 TNF-α能够促进RF/6A细胞的增殖、迁移和管腔样结构的形成,且TNF-α促进内皮细胞自噬在血管新生中发挥重要的调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李蓉	西安医学院第一附属医院眼科	44	122	7.0	9.0
2	常远		38	50	4.0	5.0
3	杜军辉	西安交通大学医学院附属西安市第九医院眼科	16	62	5.0	7.0