大鼠颅骨成骨细胞和骨细胞的分离纯化与比较研究

• 作者: 周建 石文贵 谢艳芳 陈克明 马小妮
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨细胞 成骨细胞 免疫组化 胶原Ⅰ型 骨钙素 大鼠, Sprague-Dawley
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 骨科基础研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 5008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2015.03.001

摘要

目的：探讨大鼠颅骨中骨细胞和成骨细胞的分离纯化方法,并分别比较细胞形态、碱性磷酸酶( alkaline phosphatase, ALP)活性和成骨特异性蛋白的表达情况。方法分别采用序列酶消化和EDTA螯合法,从SPF级新生SD大鼠的颅骨中分离培养骨细胞和成骨细胞,对其进行HE染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色、骨钙素( BGP)免疫荧光染色；采用偶氮偶合法对两种细胞ALP进行染色,并检测其活性；应用蛋白质印迹( Western blot)检测两种细胞的Ⅰ型胶原和BGP的表达量。结果细胞形态学观察及HE染色表明,骨细胞多呈星状或树枝状且有较多突触,而成骨细胞呈长梭形且突触较少；Ⅰ型胶原免疫组化染色与Western blot结果表明,Ⅰ型胶原在成骨细胞中表达量较高,呈棕黄色,骨细胞中表达量较低；而BGP免疫荧光染色与Western blot显示,成骨细胞中BGP表达较低,而在骨细胞中表达较高,细胞荧光染色与HE染色结果相似；ALP染色结果表明,ALP在成骨细胞中表达较高,骨细胞中表达较低；ALP活性检测与ALP染色结果相似。结论采用序列酶消化及EDTA螯合法,可以从大鼠颅骨中分离得到较纯的骨细胞及成骨细胞,利用HE染色、免疫组化、免疫荧光染色、Western blot等技术,可以对骨细胞和成骨细胞进行分离纯化与研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈克明	兰州军区兰州总医院骨科研究所	210	1887	22.0	34.0
2	马小妮	兰州军区兰州总医院骨科研究所	19	106	6.0	9.0
3	周建	兰州军区兰州总医院骨科研究所	50	335	10.0	16.0
4	石文贵	兰州军区兰州总医院骨科研究所	18	69	5.0	7.0
5	谢艳芳	兰州军区兰州总医院骨科研究所	11	50	4.0	7.0