载脂蛋白 A－I 模拟肽 D4 F 通过抑制 caspase－12减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡

• 作者: 丁明德 姚树桐 方永奇 李严严 杨娜娜 桑慧 焦鹏 田华 秦树存
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 载脂蛋白A-I模拟肽D4F Caspase-12 氧化低密度脂蛋白 巨噬细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1750-1755
• 页数: 6页
• 分类号: R363.2|R332
• 字数: 4677字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.10.004

摘要

目的：探讨载脂蛋白A－I（apolipoproteinA－I，ApoA－I）模拟肽D4F对氧化低密度脂蛋白（oxidized low－density lipoprotein，ox－LDL）诱导的巨噬细胞凋亡和内质网应激（ endoplasmic reticulum stress，ERS）凋亡途径关键分子caspase－12的影响，并阐明其可能的分子机制。方法：体外培养RAW264．7巨噬细胞，给予12．5、25和50 mg／L D4F、5 mmol／L ERS抑制剂4－苯丁酸（4－phenylbutyric acid，PBA）或5μmol／L二亚苯基碘鎓（ diphenyleneiodonium， DPI）预处理1 h后，再加入100 mg／L ox－LDL或4 mg／L ERS诱导剂衣霉素（ tunicamycin，TM）继续培养24 h。 MTT法检测细胞活力；TUNEL法检测细胞凋亡情况；试剂盒测定细胞内丙二醛（ malondialdehyde，MDA）和活性氧（ reac－tive oxygen species，ROS）水平，以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nic－otinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶活性；Western blot法检测caspase－12的表达变化。结果：与ERS抑制剂PBA相似，D4F可抑制ox－LDL或TM所致的巨噬细胞活力降低和凋亡，且呈浓度依赖性（P＜0．05）。与氧化应激抑制剂DPI相似，D4F显著抑制ox－LDL诱导的氧化应激反应，表现为ROS和MDA生成减少（ P＜0．01）、SOD活性增加以及NADPH氧化酶活性降低（P＜0．05）；与PBA和DPI相似，D4F可减轻ox－LDL诱导的巨噬细胞caspase－12活化，且呈浓度依赖性（P＜0．05）；另外，D4F还可抑制TM诱导的caspase－12活化（P＜0．05）。结论：D4F能够抑制ox－LDL诱导的巨噬细胞凋亡，其机制至少部分是通过减轻氧化应激继而抑制caspase－12活化实现的。