心肌细胞的培养鉴定及β3-AR蛋白提取方法的比较

• 作者: 朱晓丽 杨毅宁 王丽 胡小芳 陈邦党 马依彤 马苗苗
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 受体,肾上腺素能β3 肌细胞,心脏 提取法 细胞培养技术 心肌细胞 β3-AR膜蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 599-602
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.06.006

摘要

目的：优化培养乳鼠心肌细胞的技术，筛选出简便、准确、特异的提取心肌细胞β3-肾上腺素能受体（β3-AR）膜蛋白的方法。方法使用Ⅱ型胶原酶和差速贴壁法收集心肌细胞，分别用总蛋白法、超速离心法、试剂盒法提取心肌细胞β3-AR膜蛋白；BCA法进行蛋白定量；Western blot法检测蛋白样品中β3-AR和GAPDH相对含量及提取蛋白的特异性。结果优化心肌细胞的培养方法可以使所得细胞产量大、浓度高，满足后续实验。试剂盒法提取蛋白的浓度（8.26±0.29）g/L＞总蛋白法提取法的（5.12±0.47）g/L＞超速离心法的（3.20±0.37）g/L，差异均有统计学意义。Western blot检测结果示，试剂盒提取法所得β3-AR膜蛋白含量（0.22±0.05）＞超速离心法（0.09±0.03）＞总蛋白提取法（0.01±0.01），差异均有统计学意义。结论优化培养心肌细胞的方法可获得高产量、高纯度的细胞。试剂盒提取法可有效提高β3-AR膜蛋白的浓度和特异性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马依彤	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	329	1439	16.0	22.0
2	杨毅宁	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	163	632	12.0	14.0
3	陈邦党	新疆医科大学第一附属医院心脏中心	37	142	6.0	9.0
4	王丽	新疆石河子大学医学院	35	49	5.0	6.0
5	马苗苗	新疆石河子大学医学院	1	0	0.0	0.0
6	胡小芳	新疆石河子大学医学院	1	0	0.0	0.0
7	朱晓丽	新疆石河子大学医学院	2	14	1.0	2.0