hTfR 基因在体外神经干细胞的表达研究

• 作者: 岳四海 郭永坤
• 来源期刊: 中国实用神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白受体 慢病毒载体 干细胞 磁共振成像
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-25
• 页数: 3页
• 分类号: R445.2
• 字数: 4011字
• 语种: 中文

摘要

目的：将人转铁蛋白受体（hTfR）基因克隆到慢病毒表达载体pLENTI6．3，鉴定其正确性，体外感染小鼠神经干细胞并检测其表达，为活体神经干细胞（NSCs）MR分子成像提供实验基础。方法利用聚合酶链反应技术（PCR）扩增hT‐fR基因，并克隆到pLENTI6.3载体；通过菌落PCR初步筛选、BamH1酶切鉴定和测序鉴定构建的pLENTI6．3‐hTfR‐IRES‐EGFP重组载体，利用Lipofectin2000试剂将PLP1、PLP2、PLP‐VSVG和pLenti6.3‐hTfR‐IRES‐EGFP共转染293T细胞进行慢病毒包装，48 h后收集病毒上清。体外感染NSCs ，Western bolt检测hTfR的表达。结果成功构建了hTfR基因慢病毒表达载体，包装的慢病毒颗粒成功感染NSCs ，Western bolt鉴定hTfR在NSCs过表达。结论 pLENTI6.3‐hTfR‐IRES‐EG‐FP慢病毒表达载体构建成功，并建立其慢病毒表达系统，为下一步进行活体干细胞M R分子成像实验研究奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳四海	郑州大学附属郑州中心医院神经外科	8	21	2.0	4.0
2	郭永坤	郑州大学附属郑州中心医院神经外科	6	4	1.0	2.0