百草枯中毒小鼠肾脏损伤核心基因研究

• 作者: 彭艾 李新华 李昌斌 王菱 王贞 胡大勇 陈亮
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 百草枯中毒 肾脏损伤 基因芯片 生物信息学 机制
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 中毒
• 页码范围: 1208-1213
• 页数: 6页
• 字数: 4003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.11.005

摘要

目的 应用基因芯片技术研究百草枯中毒小鼠模型肾脏损伤基因表达谱,通过基因信息学分析筛选核心基因,并以分子生物学方法给予验证.方法 C57BL/6雄性小鼠20只,随机(随机数字法)分成4组,分别为对照组(A组)和染毒组(B、C、D组),每组5只.A组蒸馏水0.01 mL/g体质量灌胃,B、C、D组20％百草枯原液加蒸馏水稀释至0.05％,按0.01 mL/g体质量灌胃.A组于灌胃后即刻处理,B、C组分别于染毒6h、24h处理,D组观察48 h病死率,处理方法为麻醉后取出右肾组织样本,Affymetrix GeneChip Mouse Gene 1.0 ST Array芯片技术测定肾脏组织的基因表达谱,通过基因信息学分析筛选核心基因,并进行实时定量PCR和Western blot验证.结果 PQ灌胃后体质量明显下降,48 h病死率为100％.与对照组相比,PQ中毒6h组、24h组共有1 792个差异表达基因,基因信息学分析筛选出8个核心基因:Nlrc5、Serpinb9、Cd40、Rnf135、Dhx58、Sp110、Fcgr1、Arhgef12,进行PCR验证.Nlrc5、Rnf135、Serpinb9基因表达的差异有统计学意义(P＜0.05).再对Nlrc5、Rnf135、Serpinb9进行Westem blot验证.均与对照组比较,中毒6h组,Nlrc5、Rnf135、Serpinb9表达上调差异有统计学意义(P＜0.05),中毒24h组,Rnf135、Serpinb9表达上调差异有统计学意义(P＜0.05),Nlrc5表达下调差异有统计学意义(P＜0.01).不仅与基因芯片检测、信息学分析的结果一致,还证实了Nlrc5表达先上调(6 h)后下调(24 h).结论 Nlrc5、Rnf135、Serpinb9是急性百草枯中毒小鼠肾脏损伤的核心基因,其参与肾脏损伤的具体机制有待进一步研究.