多重PCR技术快速检测烤后烟叶转基因成分

• 作者: 余世洲 余婧 林世锋 赵杰宏 郭玉双
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 多重PCR 烤后烟叶 转基因成分
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 64-68
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.010

摘要

为提高烟叶转基因成分检测效率,建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系,通过优化该反应体系中的Mg2+、dNTP、rTaq酶、引物浓度及退火温度等参数,实验最适条件为将4对相等摩尔浓度引物预先按1∶1∶1∶1(V/V)混合,在Mg2+为1.5 mmol/L、dNTP为125 μmol/L、rTaq酶1U、混合引物1μmol/L,DNA 100 ng,退火温度65℃,循环数35个的反应条件卡,在一次PCR反应中便可同时检测烟草内源基因NR,外源基因35S启动子、NOS终止子、NPT Ⅱ筛选标记基因.优化后的反应体系能够有效地检测出转基因烤后烟叶百分比含量为0.9％(V/V)的转基因成分.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林世锋	贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室	16	35	3.0	4.0
2	郭玉双	贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室	31	163	7.0	12.0
3	赵杰宏	贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室	22	84	5.0	8.0
4	余婧	贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室	11	12	2.0	3.0
6	余世洲	贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室	3	3	1.0	1.0