薯蓣褪绿坏死花叶病毒CP基因的原核表达及抗血清的制备

• 作者: 任龙辉 张鹏远 王建光 钟宇 陈壮壮 陈穗云
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 薯蓣褪绿坏死花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 206-212
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.030

摘要

薯蓣褪绿坏死花叶病毒（yam chlorotic necrotic mosaic virus，YCNMV）是马铃薯Y病毒科柘橙病毒属暂定成员。采用RT-PCR方法，以Sprimer/M4简并引物对扩增获得的YCNMV分离物3'端基因组序列为参考序列，根据该序列设计CP基因特异引物获得YCNMV CP基因并插入pET-30a表达载体中，在BL21（DE3）菌株中诱导表达。获得的融合蛋白经Ni+-NTA柱纯化后免疫新西兰大白兔，制备抗血清。结果表明，连接在表达载体中的CP基因序列及表达的蛋白氨基酸序列与预期的CP基因核苷酸和氨基酸序列同源性均为99.65%。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，获得的融合蛋白大小约为44 kD，与预期蛋白大小相符。制备的抗血清经Western blotting和ID-ELISA检测表明，获得的多克隆抗体效价较高，能可靠、灵敏、特异地与YCNMV病毒颗粒结合，可应用到该病毒的检测中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈壮壮	云南大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
2	钟宇	云南大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
3	张鹏远	云南大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	王建光	云南大学生命科学学院	21	89	6.0	7.0
5	陈穗云	云南大学生命科学学院	38	236	8.0	13.0
6	任龙辉	云南大学生命科学学院	2	2	1.0	1.0