抗瓜类细菌性果斑病菌单克隆抗体的制备及特性鉴定

• 作者: 丁承超 刘箐 宋春美 曾海娟 李建武 王广彬 翟绪昭 邱实 郭慧琴
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 细菌性果斑病菌 单克隆抗体 制备 特性鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（23）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 228-232
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 3883字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201523042

摘要

以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F、6D、7E、4F,腹水抗体效价分别为1:102 400、1:102 400、1:25 600、1:51 200.采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化后的单克隆抗体(mAb)纯度较高,纯化后单克隆抗体(2 mg/mL)效价分别为1:12 800、1:6 400、1:3 200、1:6 400,亚型鉴定结果表明4种单克隆抗体均为IgG2 a.间接ELISA结果表明,4种单克隆抗体对8种果斑病菌结合能力不同:6F可以结合6种,6D、4F可以结合8种,7E可以结合5种.与3种非Aac近源种植物病原菌交叉反应情况为:6F、4F与2种非Aac近源种植物病原菌存在交叉反应,6D、7E与3种非Aac近源种植物病原菌均无交叉反应.