猪圆环病毒2型标记毒株的构建与iDNA疫苗的初步研究

• 作者: 代振江 刘钊 曾智勇 梁海英 汤德元 王伟丞
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 分子标记 感染性克隆 病毒拯救 iDNA疫苗
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 698-703
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为实现携带分子标记的猪圆环病毒2型标记毒株的构建,对其进行感染性DNA(iDNA)疫苗的初步研究,即构建的感染性克隆质粒既能发挥DNA疫苗的作用,同时又能在动物机体内拯救出活病毒,发挥病毒活疫苗的作用,本研究以PCV2 Cap蛋白末端具有赖氨酸延伸特征的GZ-RH1株为材料,构建该毒株的感染性克隆质粒pcD-NA3.1(+)-PCV2,并在病毒基因组中引入1个SalⅠ酶切位点作为鉴别拯救病毒的分子标记.将该感染性克隆质粒转染PK-15传代细胞进行病毒拯救后,通过IPMA、PCR-RFLP以及全基因组测序等试验对拯救病毒进行检测和鉴定,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力.结果表明,利用构建的感染性克隆质粒拯救获得的PCV2标记毒株,经盲传10代后毒价可到105.3 TCID50/mL,分子标记能够稳定存在,该感染性克隆质粒可以应用到PCV2 iDNA疫苗的初步研究中.昆明小鼠接毒试验结果表明,构建的感染性克隆质粒在小鼠体内也具有感染性,能够拯救出PCV2标记毒株,且可以诱导产生抗PCV2的抗体,与体外拯救的标记毒株免疫小鼠具有类似的体内生物学特性,表明PCV2 iDNA新型疫苗构建策略是可行的.本研究为进一步研究PCV2 iDNA疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤德元	贵州大学动物科学学院	256	1165	16.0	26.0
2	曾智勇	贵州大学动物科学学院	205	619	12.0	17.0
3	刘钊	贵州大学动物科学学院	40	80	5.0	7.0
4	代振江	贵州大学动物科学学院	26	57	3.0	6.0
5	梁海英	贵州大学动物科学学院	53	98	6.0	8.0
6	王伟丞	贵州大学动物科学学院	32	41	4.0	5.0