P2X7受体对牙周膜干细胞成骨分化的作用

• 作者: 吴礼安 孙亚男 孙薇 武俊杰 魏建敏
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 诱导 牙周膜干细胞 培养 成骨分化 P2X7受体 RUNX2 OCN 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 861-867
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344

摘要

背景：研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。目的：初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法：分离培养人牙周膜干细胞，分为4组，分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及普通培养基培养，于成骨诱导7，14 d，利用茜素红染色检测成骨效果，qRT-PCR， Western blot检测OCN、Runx2以及P2X7受体的表达。结果与结论：茜素红染色显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组牙周膜干细胞的成骨效果在7 d时显著好于成骨诱导液组，但在14 d时成骨诱导液组成骨效果显著好于成骨诱导液+三磷酸腺苷组(P <0.05)；在成骨诱导7 d时， qRT-PCR结果显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组Runx2，OCN mRNA的表达达到峰值，而14 d时明显降低(P <0.05)。成骨诱导7 d时，成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体mRNA的表达量明显高于三磷酸腺苷组(P <0.05)，成骨诱导液组和对照组未见P2X7受体mRNA的表达，成骨诱导14 d时，成骨诱导液+三磷酸腺苷组表达量下降，明显低于三磷酸腺苷组，差异有显著性意义(P <0.05)。Western blot结果显示，成骨诱导7 d时，成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达达到峰值，高于三磷酸腺苷组，而成骨诱导液组表达量低，对照组几乎没有表达；成骨诱导14 d时，成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时明显下降，而三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时有所增加。结果表明外源性三磷酸腺苷可在牙周膜干细胞成骨诱导前7 d明显提高成骨效果，但在7 d后，抑制成骨诱导效果，三磷酸腺苷可以激活牙周膜干细胞P2X7受体表达，且P2X7受体的表达与牙周膜干细胞的成骨效果正相关。