胰岛素样生长因子结合蛋白7表达质粒的构建及其瞬时转染对SMMC7721肝癌细胞增殖的影响

• 作者: 岳春燕 彭健 杨满意 胥洪鹃
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TA克隆 胰岛素样生长因子结合蛋白7 实时荧光定量PCR 增殖
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: R73-3
• 字数: 3172字
• 语种: 中文

摘要

目的 采用TA克隆的方法构建IGFBP7表达载体,考察IGFBP7过表达对SMMC7721细胞生存活力的影响.方法 RT-PCR法调取IGFBP7表达基因,构建pMD19-T Simple-IGFP7载体,测序鉴定后与pIRES2-ZsGreen1质粒进行拼接构建表达质粒;随后表达质粒转染SMMC7721细胞,RTFQ-PCR测定SMMC7721细胞中IGFBP7 mRNA水平,MTT检测IGFBP7表达质粒转染对SMMC7721细胞增殖的影响.结果 IGFBP7 cDNA设计长度为840 bp,电泳结果可在750～1 000bp观察到清晰单一条带,表明成功调取IGFBP7基因;pMD19-TS-IGFBP7载体和pIRES2-ZsGreen1-IGFBP7表达质粒测序结果正确,表明表达质粒构建成功;RTFQ-PCR结果显示IGFBP7转染组细胞IGFBP7 mRNA水平显著升高;MTT结果显示IGFBP7转染组细胞增殖明显下降.结论 成功用TA克隆的方法构建了IGFBP7表达载体,IGFBP7的过表达能显著抑制SMMC7721细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭健		111	861	17.0	24.0
2	胥洪鹃		8	17	3.0	4.0
3	杨满意		10	39	4.0	6.0
4	岳春燕		6	7	2.0	2.0