糖基化改造 β-葡萄糖醛酸苷酶的热稳定性

• 作者: 冯旭东 李春 樊艳爽 王小艳 韩蓓佳
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: N-糖基化 β-葡萄糖醛酸苷酶 热稳定性 分子模拟 动力学
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 3669-3677
• 页数: 9页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/j.issn.0438-1157.20150885

摘要

以 N-糖基化提高毕赤酵母重组表达 β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-P)的热稳定性为目的,在 PGUS-P 模拟结构分析的基础上,半理性方法设计并通过定点突变引入具有 EAS(enhanced aromatic sequence)序列特征的新 N-糖基化位点,经毕赤酵母重组表达后,获得了 3 个新糖基化的突变酶 PGUS-P-26、PGUS-P-35 和 PGUS-P-259.反应动力学分析表明,与原始 PGUS-P 相比,突变酶 PGUS-P-26、PGUS-P-35 和 PGUS-P-259 催化甘草酸水解的Km 变小,Kcat/Km 增加,表明其对底物甘草酸的亲和力和催化效率均得到提高.热稳定性分析表明,PGUS-P-35和 PGUS-P-259 的热稳定性得到改善,在 65℃下保温 90 min,其热稳定性相对 PGUS-P 分别提高了 13%和 11%.研究表明在蛋白质的合适位点引入糖基修饰对提高蛋白的热稳定性具有促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李春	天津大学化工学院	106	629	13.0	20.0
5	王小艳	天津大学化工学院	1	5	1.0	1.0
6	樊艳爽	北京理工大学生命学院	1	5	1.0	1.0
7	韩蓓佳	北京理工大学生命学院	1	5	1.0	1.0
8	冯旭东	北京理工大学生命学院	13	36	3.0	5.0