禽致病性大肠杆菌未知功能基因突变株的构建及致病特性分析

• 作者: 刘静 卢炜 徐亚亚 陈祥 高崧
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽致病性大肠杆菌 抑制差减杂交 基因插入突变株
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 58-61
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3453字
• 语种: 中文

摘要

采用抑制差减杂交技术(SSH)对禽致病性大肠杆菌(APEC)高致病株E037(血清型078)与非致病菌株K-12 MG1655进行基因组差异片段克隆与分析.从E037株中共检出17个特异性差异片段,选取其中的编号为88#的基因进行突变株的构建.通过PCR扩增出88#的目的基因片段,并插入到T-easy载体的多克隆位点中,随之克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体pMEG375-88#,将突变载体转化到受体APEC E037中,根据同源重组原理,筛选出E03788#基因插入突变株E037-1.对21日龄白来航SPF鸡右胸气囊分别接种E037、E037-1株0.1mL (108 cfu/mL),在6,24和48 h分别扑杀SPF鸡,无菌采集血液、心脏、肝、脾、左肺、肾进行细菌学检查,同时进行病变观察.结果显示:接种鸡6h后,E037-1在肝、脾和肺中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P＜0.01);接种鸡24 h后,E037-1在心脏、肝、脾和肺中的细菌数与E037比较有所降低,差异显著(P＜0.05);接种鸡48 h后,E037-1在心、肝中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P＜0.01),说明E037-1突变株的致病性明显下降.结果显示88#基因可能是APEC的致病相关基因,其功能值得进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高崧	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	134	1223	19.0	27.0
2	陈祥	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	57	525	11.0	22.0
3	刘静		91	120	5.0	8.0
4	卢炜		113	195	7.0	11.0
5	徐亚亚		43	33	3.0	3.0