红花单功能反馈抑制敏感型CtAK1基因克隆、序列分析及表达载体构建

• 作者: 官丽莉 张娜 张娟 张玲 李海燕 李红群 杜林娜 杨晶 王艳芳
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 红花 天冬氨酸激酶 RACE 生物信息学 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 3740-3745
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.24.022

摘要

目的分离红花天冬氨酸代谢途径关键酶天冬氨酸激酶(AK)基因的全长cDNA序列,进行植物超表达载体构建.方法根据红花种子转录组文库注释和qRT-PCR鉴定的AK基因核心片段及表达分析数据,采用RACE技术获得红花AK(CtAK)基因的全长cDNA,利用DNA重组技术构建植物超表达载体.结果生物信息学分析表明,CtAK基因全长1 703 bp,ORF区为1 626 bp,编码541个氨基酸残基,功能结构域分析推测,该基因可能为单功能反馈抑制敏感植物AK1.通过DNA重组技术成功构建以35 S为启动子和Bar抗性基因并含有叶绿体转运肽的pCAMBIA3301-CTP-AK1植物超表达载体.结论获得CtAK1基因的编码序列并构建植物超表达载体,为进一步研究其生物学功能及其在红花氨基酸代谢调控中的作用机制奠定基础.