碳酸酐酶Ⅱ基因克隆及在毕赤酵母中的异源表达

• 作者: 卫玲 徐晓晶 赵莹
• 来源期刊: 上海医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 碳酸酐酶Ⅱ 毕赤氏酵母 异源表达 甲醇诱导
• 年，卷（期）: 2015,（17）
• 所属期刊栏目: 药物研发
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3139字
• 语种: 中文

摘要

碳酸酐酶Ⅱ（carbonic anhydrase Ⅱ, CA Ⅱ）是参与机体多种代谢活动和病理活动的一种重要催化酶。通过基因重组、电转化等方式，得到能异源高表达人 CA Ⅱ的毕赤酵母（Pichia. pastoris）GS115工程菌。对工程菌进行培养及甲醇诱导后，经离子交换层析柱分离纯化后得到较纯的重组 CA Ⅱ。通过 Western blotting、酶活力及圆二色谱检测发现重组和商品化 CA Ⅱ具有相似的酶活力和构象，为 CA Ⅱ今后进一步在临床的研究和工业应用打下了基础。