ERG 基因3′端非翻译区荧光素酶报告载体的构建及其活性

• 作者: 伍尚标 吴小兵 徐学虎 徐远东 陈戎 黎淑玲
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: ERG 微小RNA 双荧光素酶报告载体 3′端非编码区
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3097-3100
• 页数: 4页
• 字数: 3315字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建人ERG基因3′端非翻译区（3′UTR）双荧光素酶报告载体，为研究ERG基因的转录后调控提供实验基础。方法以基因组DNA为模板PCR扩增ERG的3′UTR序列，并连接到psiCHECK2双荧光素酶报告载体的多克隆位点，测序鉴定psiCHECK2－ERG载体构建是否成功。通过生物信息学预测ERG 3′UTR具有miR－145－5p的结合靶点。通过共转染miR－145－5p模拟物和psiCHECK2－ERG载体，检测荧光素酶的活性，以共转染miR－145－5p模拟物对照和psiCHECK2－ERG载体作为参照。结果构建了含有ERG 3′UTR序列的双荧光素酶报告系统，酶切电泳和基因测序证实序列与目标一致。 miR－145－5p模拟物和报告质粒共转染者荧光素酶活性明显下降（28.39％，P＜0.05）。结论含有ERG 3′UTR的双荧光素酶报告载体构建成功。初步鉴定miR－145－5p作用ERG基因3′UTR，对ERG发挥转录后水平调控作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐学虎	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	15	53	4.0	6.0
2	黎淑玲	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	9	45	2.0	6.0
3	吴小兵	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	16	60	3.0	7.0
4	伍尚标	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	8	27	3.0	5.0
5	陈戎	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	11	45	3.0	6.0
6	徐远东	广州医科大学附属第三医院胃肠外科	5	7	2.0	2.0