重组腺相关病毒的小量制备与体内体外感染研究

• 作者: 卢剑清 孙飞一 邓玉林 马宏
• 来源期刊: 科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组腺相关病毒 病毒包装 病毒纯化
• 年，卷（期）: 2015,（18）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: Q93-3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3981/j.issn.1000-7857.2015.18.012

摘要

重组腺相关病毒(rAAV)是近年来发展的较为成熟的一种病毒基因载体,常用于过表达或者敲低等动物模型的建立与基因治疗等.本研究使用三质粒共转染的方法,在HEK293细胞中包装出含绿色荧光蛋自(EGFP)基因的rAAV,通过一系列实验,确定纯化方法为脱氧胆酸钠裂解,高浓度NaCI去除杂蛋白,最后通过肝素层析柱纯化,经超滤管浓缩后其滴度可达1013 gene copys/mL 以上.将纯化后的rAAV感染HEK293细胞,通过实验确定使用感染复数为10s,感染3d的细胞能够表达出高水平的EGFP.将rAAV注射入大鼠中脑黑质致密部,经过3周的感染发现,rAAV可以特异性地感染多巴胺能神经元,表达出EGFP.通过以上实验,建立了一个在实验室小量制备rAAV的方法,且此方法制备的rAAV完全满足体内与体外实验的要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓玉林		192	865	13.0	20.0
2	卢剑清		6	8	2.0	2.0
3	马宏		15	13	2.0	3.0
4	孙飞一		5	4	1.0	2.0