酪蛋白水解物中ACE抑制肽分离及氨基酸序列分析

• 作者: 冯永强 刘蓄瑾 夏磊 孙振刚 武文起 胡志和 薛璐 贾莹
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 牛乳酪蛋白 胃蛋白酶 胰蛋白酶 血管紧张素转化酶 抑制肽
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 成分分析
• 页码范围: 156-163
• 页数: 8页
• 分类号: TS252.42
• 字数: 5231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201524028

摘要

以牛乳酪蛋白为底物,先经胃蛋白酶水解,再经胰蛋白酶水解,从水解物中分离获得血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽并确定其氨基酸序列.酪蛋白的双酶水解物经超滤和葡聚糖凝胶色谱分离,分离得到3个组分,收集高ACE活性抑制效果组分Ⅱ和Ⅲ.采用离子色谱法分析水解片段的氨基酸组成,液相色谱-质谱法分析水解片段的氨基酸序列,采用固相合成法制备获得的短肽片段,用分光光度法检测ACE活-性抑制效果.结果表明,组分Ⅱ包含缬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、酪氨酸,共8种氨基酸,组分Ⅲ包含痕量的丝氨酸和酪氨酸;将组分Ⅱ和Ⅲ经液相色谱-质谱分析,获得8个片段,其中,αs2-f(56～57)∶YS、αs2-f (98～107)∶YQKFPQYLQY和κ-f (52～61)∶INNQFLPYPY具有ACE活性抑制作用,其IC50值分别为11.89、l1.75 μg/mL和421 μg/mL.