摘要:
目的:探讨环氧化酶 ̄2(COX ̄2)抑制药塞来昔布对鼻咽癌放射抗拒细胞株 CNE ̄2R 放射敏感性的影响及其机制。方法人鼻咽癌 CNE ̄2细胞株经2,4,6,8 Gy 梯度剂量照射,每个剂量照射3次,构建鼻咽癌放射抗拒亚株 CNE ̄2R,克隆形成实验验证其放射敏感性,分别给予25,50,75μmol.L-1塞来昔布作用于 CNE ̄2及 CNE ̄2R 细胞后,Western blotting实验检测 COX ̄2蛋白表达变化,克隆形成实验检测单纯放疗或放疗联合30μmol.L-1塞来昔布作用于 CNE ̄2和 CNE ̄2R细胞后的存活分数差异,流式细胞术检测单纯放疗或放疗联合塞来昔布对细胞凋亡的影响,免疫荧光实验检测放疗后鼻咽癌细胞核内γ ̄H2AX 荧光焦点数量。结果放射抗拒 CNE ̄2R 细胞放射生物学参数 SF2、D0、Dq 及 N 值分别为(0.81±0.05),(2.15±0.07) Gy,(2.94±0.08) Gy,(3.91±0.07),均显著高于 CNE ̄2细胞株(0.61±0.08),(1.47±0.06) Gy,(1.68±0.10) Gy,(3.13±0.05);塞来昔布预处理后 COX ̄2蛋白表达随药物浓度增高而显著下调;克隆形成实验显示塞来昔布作用后, CNE ̄2及 CNE ̄2R 细胞经射线照射后存活分数均降低;射线照射联合塞来昔布作用于 CNE ̄2细胞后其凋亡率[(13.10±0.63)%]较对照组[(4.90±0.71)%]增加,作用于 CNE ̄2R 细胞后凋亡率[(5.30±0.75)%]较对照组[(1.82±0.82)%]增加;塞来昔布处理后诱导鼻咽癌细胞株的放射敏感性增高,射线照射24 h 后细胞核内γ ̄H2AX 荧光焦点数增加,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论塞来昔布能够增强鼻咽癌放射抗拒细胞株 CNE ̄2R 的放射敏感性。