逐级盐析法结合双水相萃取纯化葛仙米藻蓝蛋白

• 作者: 汪兴平 田盼盼 程超
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 葛仙米 藻蓝蛋白 逐级盐析 双水相萃取 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 质谱分析
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 工艺技术
• 页码范围: 16-22
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.1
• 字数: 6382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201524003

摘要

利用逐级盐析法结合双水相萃取对葛仙米藻蓝蛋白进行纯化,设计三因素二次回归正交旋转组合试验对提取工艺进行优化,并应用Design-Expert 7.0软件建立了各影响因素与萃取纯度的数学回归模型.结果显示最佳的提取工艺为:20％(NH4)2SO4盐析去沉淀后用40％和50％ (NH4)2SO4盐析得藻蓝蛋白,再用质量分数10％的聚乙二醇6 000、质量分数18％的(NH4)2SO4进行双水相萃取.所得产物纯度可达到8.6,回收率为71.40％.对所得产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得到清晰的两条条带(条带1和条带2),其分子质量分别在35 ku和15ku左右.通过质谱分析可知,条带2的分子质量为15ku左右,等电点5.35,部分肽的氨基酸序列为TPLTEAVAAADSQGR和DIGYYLR.通过SWISS-MODEL网站模拟蛋白质结构得出,条带2可能是葛仙米藻蓝蛋白的α亚基.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程超	湖北民族学院生物科学与技术学院	86	1156	17.0	30.0
5	汪兴平	湖北民族学院生物科学与技术学院	71	1250	20.0	31.0
9	田盼盼	湖北民族学院生物科学与技术学院	16	62	5.0	7.0