红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析

• 作者: 刘伟灿 姚娜 张伟 张娜 张玲 李喜明 李海燕 杨晶 王艳芳
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 红花 天冬氨酸激酶 基因克隆 同源性 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 3065-3070
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.20.018

摘要

目的 克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量.方法 根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(CtAK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增CtAK基因片段并连接到克隆载体上,经PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序.同时利用荧光定量PCR技术对其进行基因表达量的分析.结果 克隆了红花CtAK基因的核心片段,分离到486 bp的基因序列.根据CtAK基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR分析,CtAK基因在红花品种川红1号初花后13d表达量最高.结论 系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK基因具有较高的同源性.