罗勒烯信号传导途径各组分突变体高通量活体荧光筛选技术系统的建立

• 作者: 刘春林 刘琪文 徐健 李浪 阮颖
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: β-罗勒烯 PR1启动子 PDF1.2启动子 荧光素酶基因 活体荧光检测系统
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 102-107
• 分类号: Q943
• 语种: 中文

摘要

为了高效率地发现罗勒烯信号传导途径上的各信号传递成分,本研究拟采用正向遗传学的策略,即利用EMS诱变与荧光素酶-荧光素活体荧光成像检测技术体系相结合的方法筛选突变体.为此,构建了指示基因启动子PR1pro::Luciferase和PDF 1.2pro::Luciferase质粒并转化拟南芥;通过抗性筛选与PCR检测,鉴定获得了T3代转基因纯合子植株.同时,购买了合适的高灵敏CCD相机、暗箱与软件,通过组装调试,成功制造了一台自制的、经济适用的活体荧光检测仪.转基因纯合植株经过茉莉酸、水杨酸或罗勒烯处理和喷施荧光底物后,放到荧光检测仪中,成功观察到了诱导后的转基因植株释放出高亮荧光,说明活体荧光成像检测系统构建成功.这些结果为进一步利用正向遗传学的方法高效筛选罗勒烯信号传导途径中各成分的突变体植株,以及阐明罗勒烯诱导的防御反应的作用机理奠定了良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘春林		53	557	14.0	23.0
3	刘琪文		2	6	1.0	2.0
4	徐健		4	6	2.0	2.0
8	李浪		1	0	0.0	0.0