突变型Rad50腺病毒载体的制备及其在人鼻咽癌细胞株CNE1中的最适感染量测定

• 作者: 严睿成 叶进 吴喜福 常利红 张革化 朱玲 黄健聪 黎景佳
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒 鼻咽肿瘤 感染倍率
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 2143-2146
• 页数: 4页
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.13201/j.issn.1001-1781.2015.24.010

摘要

目的:测定携带突变型Rad50基因的重组腺病毒载体Ad-Rad50-GFP在人鼻咽癌细胞株CNE1中的表达及其对CNE1的最适感染倍率(MOI).方法:终点稀释法测定Ad-Rad50-GFP生物滴度,细胞生长曲线观察重组腺病毒载体对CNE1生长的影响,荧光显微镜下计算重组腺病毒载体的转染效率;免疫印迹实验检测以最适感染量感染后CNE1细胞内突变型Rad50蛋白的表达.结果:Ad-Rad50-GFP生物滴度为1.26×1011pfu/ml,重组腺病毒载体以不高于50的感染倍率转染时对CNE1生长无明显影响,且MOI=50时转染24 h后GFP表达水平最高,可检出高表达的突变型Rad50蛋白,在转染72 h后仍维持约70％的转染效率.结论:重组腺病毒载体Ad-Rad50-GFP能有效转染CNE1细胞并使其表达突变型Rad50蛋白,MOI=50为Ad-Rad50 GFP对CNE1的最适感染倍率.