EGb761对LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白表达的调节

• 作者: 张钦 曾振华 杨娅婷 王义宁 陈仲清
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: LPS THP-1细胞 EGB761 HMGB1 NF-κB(P-65)
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3809-3812
• 分类号: Q593|R285.5|R631.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2015.20.003

摘要

目的:探讨EGb761对LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白表达的调节,为EGb761的临床运用提供可行的依据.方法:LPS(1 μg/mL)诱导不同时间后,western blotting检测THP-1细胞上清液中HMGB1蛋白含量变化及不同浓度EGb761对LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白的表达和NF-κB的活性;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量.共聚焦显微镜观察EGb761对LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白核转位变化.结果:(1)LPS组IL-1β、IL-6、TNF-α的含量在刺激6-12h后明显高于空白对照组,而EGb761 +LPS组IL-1β、IL-6、TNF-α的含量均显著低于LPS组(P＜0.05).(2)EGb761处理LPS诱导THP-1细胞6h后细胞上清液NF-κB活性表达量较空白对照组低,随着处理时间延长至12h,NF-κB的活性表达量呈明显下降趋势(P＜0.05).(3)LPS诱导THP-1细胞18h后,细胞上清液中HMGB1蛋白含量呈明显升高趋势(P＜0.05).(4)不同浓度EGb761对LPS诱导THP-1细胞18h后,HMGB1蛋白含量较空白对照组有下降趋势,HMGB1蛋白含量随着EGB761浓度增加至100 μg/mL呈下降趋势并呈浓度依赖效应(P＜0.05).(5)LPS诱导THP-1细胞后,在共聚焦显微镜下可见胞浆中大量HMGB1蛋白标记分布,而EGb761 +LPS共同诱导THP-1细胞后胞浆中可见少量HMGB1蛋白分布.结论:LPS可诱导THP-1细胞IL-1β、IL-6、TNF-α表达增多及NF-κB活化,导致HMGB1蛋白表达增多及核转位,而EGB761能抑制THP-1细胞Ⅱ-1β、IL-6、TNF-α表达及NF-κB活化,调节HMGB1蛋白的表达及核转位.