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摘要:
目的 明确氨基端或羧基端缺失突变50个氨基酸的HBx对肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 PCR法分别扩增氨基端、羧基端缺失50个氨基酸的HBx基因片段( HBxn、HBxc ) ,并定向插入绿色荧光蛋白( GFP)真核表达载体pEGFP-C1以构建重组体pGFP-HBxn及pGFP-HBxc. 脂质体转染法将重组体转染HepG2细胞,用G418筛选,荧光显微镜下观察. RT-PCR鉴定稳定表达GFP-HBxn、GFP-HBxc融合蛋白的HepG2细胞系. MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测p16的表达. 结果 RT-PCR检测示 HepG2/GFP -HBxn、HepG2/GFP -HBxc 细胞分别有 HBxn、HBxc 的转录和表达. MTT 法检测示HepG2/GFP-HBx、HepG2/GFP-HBxc细胞的增殖速度明显快于HepG2、HepG2/GFP、HepG2/GFP-HBxn细胞(P<0.05). 流式细胞术检测示HepG2/GFP-HBx、HepG2/GFP-HBxc细胞的G0/G1 期百分比较HepG2、HepG2/GFP细胞明显减少(P<0.05),而 HepG2/GFP-HBxn细胞与 HepG2、HepG2/GFP 细胞比较差异无统计学意义.Western blots 显示HepG2/GFP-HBx、HepG2/GFP-HBxc细胞的P16表达量明显低于HepG2、HepG2 /GFP 细胞, HepG2/GFP-HBxn细胞P16的表达水平与HepG2、HepG2/GFP细胞无明显差异. 结论 HBx及羧基端缺失突变50个氨基酸的HBx能促进肝癌细胞的增殖,其作用可能是通过抑制抑癌基因p16表达而调控细胞周期进而促进肝癌细胞的增殖所致;HBx氨基端可能是HBx调控细胞周期及促进肝癌增殖的重要功能区域.
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文献信息
篇名 野生型及羧基端缺失突变HBx对肝癌细胞增殖的影响
来源期刊 广东医学 学科
关键词 乙型肝炎病毒 HBx蛋白 缺失突变 p16 细胞周期
年,卷(期) 2015,(24) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 3742-3745
页数 4页 分类号
字数 3397字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 崇雨田 中山大学附属第三医院感染科 147 693 12.0 18.0
2 杨林 中山大学附属第三医院感染科 61 313 7.0 15.0
3 麦丽 中山大学附属第三医院感染科 25 116 6.0 9.0
4 朱建芸 中山大学附属第三医院感染科 49 203 8.0 11.0
5 姚雪兵 南昌大学第二附属医院感染科 4 5 1.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
乙型肝炎病毒
HBx蛋白
缺失突变
p16
细胞周期
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
广东医学
半月刊
1001-9448
44-1192/R
大16开
广州市越秀区惠福西路进步里2号之6
46-66
1963
chi
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