促肾上腺皮质激素刺激H295R细胞分泌醛固酮和皮质醇的信号通道

• 作者: 倪栋 刘同族 王行环 胡东亮
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 促肾上腺皮质激素 醛固酮 皮质醇 信号通道
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 泌尿外科
• 页码范围: 2999-3002
• 页数: 4页
• 字数: 3301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.12.027

摘要

目的 观察促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激人肾上腺皮质癌H295R细胞后对醛固酮和皮质醇的影响,探讨相关信号通道在介导该反应中的作用.方法 用慢病毒包装的促ACTH受体(ACTHR)高表达载体感染H295R细胞作为实验组,同时设立对照组.感染后48 h应用Westernblot和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证ACTHR表达.100nmol/L ACTH刺激实验组和对照组细胞,同时加入ACTH相关信号通道抑制剂:环磷酸腺苷(cAMP)抑制剂PKI(终质量浓度4μmol/L)、蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89(终质量浓度10 μmol/L)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂BIM1(终质量浓度3 μmol/L)及钙离子通道抑制剂KN-93(终质量浓度10 μmol/L),在ACTH刺激后5、30 min及24 h分别测定醛固酮合成酶(CYP11B2)和皮质醇合成酶(CYP11 B1)的mRNA表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定上述各时间点醛固酮和皮质醇激素的含量,对比各时间点醛固酮和皮质醇的抑制效果,判定在介导各反应中的关键信号通道.结果 实验组细胞ACTHR在蛋白水平和mRNA水平分别增加2.4倍和18倍(P＜0.05).对醛固酮而言,ACTH刺激5 min及24h后各组细胞均无法被抑制;但在刺激30 min时cAMP抑制组CYP11 B2 mRNA表达明显受到抑制(抑制率为39％,P＜0.05),而在同时点醛固酮激素水平,PKA抑制组降幅最明显[(79.31 ±5.21) ng/L比(86.45±6.37) ng/L,P＜0.05];对皮质醇而言,无论是CYP11B1 mRNA还是皮质醇激素水平,各时间点的cAMP或PKA抑制组表达水平均受到明显抑制(P＜0.05).结论 ACTH主要通过cAMP/PKA信号通道对皮质醇分泌发挥重要作用,但对刺激醛固酮激素分泌具有一定时限性,可能还有其他因素或信号通道参与.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王行环	武汉大学中南医院泌尿外科	103	444	12.0	15.0
2	刘同族	武汉大学中南医院泌尿外科	47	252	10.0	14.0
3	胡东亮	武汉大学中南医院泌尿外科	10	64	2.0	8.0
4	倪栋	武汉大学中南医院泌尿外科	7	7	2.0	2.0