供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用

• 作者: 周芳 宋明宝 康华莉 朱光旭 杨建勇 潘兴华 阮光萍 黄岚
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮祖细胞 平滑肌细胞 细胞表型 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 769-776
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 字数: 6268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.05.001

摘要

目的：探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞（EPCs）对血管平滑肌细胞（SMCs）表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法：脱臼处死1～2月龄、19～26月龄SD大鼠，应用含15％ FBS的DMEM／F12培养基（含内皮细胞生长添加剂100 mg／L、肝素100 mg／L、青霉素、链霉素各1×105 U／L）培养EPCs，取1～2月龄大鼠腹主动脉，组织块法培养血管SMCs，应用DiI-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系，上室为融合生长状态的EPCs，下室为SMCs，实验分4组：（1）第3代SMCs（P3）组；（2）第4代SMCs（P4）组；（3）第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养（P4YE）组；（4）第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养（ P4AE）组。 Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达；[3 H ]-TdR掺入法检测SMCs增殖；细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果：与P3组相比， P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调，而osteopontin表达显著增强；P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别；与P4组相比，年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达，抑制第4代SMCs的增殖和迁移；与老龄大鼠来源的EPCs相比，年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换，抑制SMCs增殖和迁移。结论：共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移，年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换，并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。