适合人肌母细胞的无血清培养基

• 作者: 刘爱兵 刘理金 刘谋元 周立冬 王琳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 肌母细胞 胎牛血清 无血清 培养基 血清替代物 谷氨酰胺 增殖 细胞培养
• 年，卷（期）: 2015,（51）
• 所属期刊栏目: 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 8271-8275
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.51.013

摘要

背景:肌母细胞体外培养大多使用添加胎牛血清培养基,存在很多不足,开发无血清培养基,更加稳定、安全、经济,有广泛的应用前景.目的:初步探索适合人肌母细胞培养的无血清培养基.方法:配制含胎牛血清培养基(DMEM/F12 1:1添加胰岛素样生长因子1、碱性成纤维细胞生长因子和体积分数20％胎牛血清),间充质干细胞无血清培养基组(无血清培养基、2％血清替代物、2 mmol/L L-谷氨酰胺,人脐带间充质干细胞,细胞纯度大于99％,UltraCULTURETM添加血清替代物,谷氨酰胺).自制无血清培养基组(GibcoTM添加胰岛素样生长因子1,碱性成纤维细胞生长因子,谷氨酰胺).3种培养基分别对人肌母细胞分别进行培养,观察肌母细胞的形态、免疫组织化学的鉴定,计算克隆的形成率,绘制细胞生长的曲线,MTT检测肌母细胞的活性,比较3种培养基培养肌母细胞增殖、分化的差异.结果与结论:各组细胞形态上无明显差异;各组免疫组织化学鉴定肌母细胞纯度均达99％;含胎牛血清培养基组和自制无血清培养基组克隆形成率显著高于间充质干细胞无血清培养基组(P＜ 0.01),含胎牛血清培养基组克隆形成率显著高于自制无血清培养基组(P＜0.01);含胎牛血清培养基组与自制无血清培养基组细胞数远高于间充质干细胞无血清培养基组;自制无血清培养基组细胞活性显著高于含胎牛血清培养基组和间充质干细胞无血清培养基组(P＜0.01).自制无血清培养基组可有效用于肌母细胞的培养,在促进肌母细胞早期贴壁、增殖上还需进一步优化.