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摘要:
背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要.目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况.方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用门静脉穿刺原位灌注肝脏的方法分离肝脏,采用密度梯度离心获得肝星状细胞,利用形态学、免疫荧光染色等方法对原代肝星状细胞进行鉴定;将培养24 h肝星状细胞用质量浓度10 μg/L转化生长因子β1刺激48 h,同时设PBS组进行对比.结果与结论:通过原位灌注肝脏并且酶消化的方法可以成功获得小鼠原代肝星状细胞,并且锥虫蓝染色活率为(97.2±0.8)%,免疫荧光染色纯度为(90.4±1.2)%,细胞计数总量约2.5×106/只.实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与PBS组比较,转化生长因子β1刺激组的肝星状细胞平滑肌肌动蛋白α、Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05).结果证实,实验采用的改良的培养方法可更高效高质量的获得原代肝星状细胞,转化生长因子β1刺激可导致肝星状细胞活化,分泌致纤维化因子.
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文献信息
篇名 转化生长因子β1刺激改良培养小鼠原代肝星状细胞的活化
来源期刊 中国组织工程研究 学科 医学
关键词 组织构建 组织工程 肝星状细胞 肝纤维化 原代培养 分离 鉴定 转化生长因子β1 胶原蛋白 平滑肌肌动蛋白α 国家自然科学基金
年,卷(期) 2015,(51) 所属期刊栏目 软骨组织构建
研究方向 页码范围 8234-8240
页数 7页 分类号 R318
字数 6785字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.51.007
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组织构建
组织工程
肝星状细胞
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鉴定
转化生长因子β1
胶原蛋白
平滑肌肌动蛋白α
国家自然科学基金
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期刊影响力
中国组织工程研究
旬刊
2095-4344
21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
8-584
1997
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