ExoQuick 提取人血清外泌体方法改良及比较

• 作者: 刘运德 周迪苏 宋士伟 李朝阳 李雪 王仁峰 耿振 鲍会静
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 外泌体 超速离心法 ExoQuick试剂盒法 方法改良
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2458-2462
• 页数: 5页
• 字数: 4007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2015.15.015

摘要

目的:优化经ExoQuick 提取人血清中外泌体(exosome)的方法以获得高质量 exosome,并与超速离心法进行比较.方法:分别采用ExoQuick试剂盒及其改良方法、超速离心法提取人血清exosome.利用透射电镜进行形态学观察;2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法进行蛋白定量;Western blot检测exosome 表面标志物CD63;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达差异.结果:3种方法均可提取到血清exosome ,电镜下观察到圆形或椭圆形膜性囊泡结构;ExoQuick试剂盒法及其改进方法提取所得样本浓度显著高于传统超速离心法(P < 0.05);SDS-PAGE显示3种方法提取样本蛋白表达强度及丰度存在差异;Western blot表明3种方法提取exosome 均表达其表面特异性标志物CD63, 且含同浓度蛋白的情况下, ExoQuick 试剂盒法及改良法其 CD63 含量明显高于传统超速离心法. 结论:3 种方法均能提取血清中exosome,ExoQuick试剂盒法及改良方法提取exosome 效率更高, 同时改进方法能够有效地去除提取样品中的杂蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘运德	天津医科大学医学检验学院	80	394	11.0	17.0
2	李雪	天津医科大学医学检验学院	26	121	7.0	10.0
3	鲍会静	天津医科大学医学检验学院	10	44	4.0	6.0
4	周迪苏	天津医科大学医学检验学院	7	24	2.0	4.0
5	宋士伟	天津医科大学医学检验学院	3	40	3.0	3.0
6	王仁峰	天津医科大学医学检验学院	3	24	2.0	3.0