抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

• 作者: 吴胜兰 张良鹏 汤绍辉 潘兹书 王旷靖 胡卫
• 来源期刊: 中国药房
• 学科: 医学
• 关键词: 重组hAFP/hTERT双启动子 RNA干扰 人胰岛素样生长因子2基因 肝癌Huh-7细胞
• 年，卷（期）: 2015,（22）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 3059-3062
• 页数: 4页
• 分类号: R965|R979.1
• 字数: 3861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.22.11

摘要

目的：研究抑制人胰岛素样生长因子2（IGF2）基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法：将重组人甲胎蛋白（hAFP）和人端粒酶逆转录酶（hTERT）双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3（简称siRNA3）转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞，另设阴性对照（载体pGL3-hAFP-hTERT）组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达；酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性；流式细胞仪检测转染48 h后细胞周期、细胞凋亡；Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白（Cyclin）E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果：与阴性对照组和空白对照组比较，转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱，转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低，G1期Huh-7细胞明显增加，S期Huh-7细胞明显减少；Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加，IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱，以上差异具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化（P＞0.05）。结论：重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖，其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达，进而引起细胞增殖相关基因PC-NA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤绍辉	暨南大学附属第一医院消化内科	164	444	9.0	14.0
2	潘兹书	武汉大学生命科学院	19	235	8.0	15.0
3	胡卫	武汉大学医院内科	17	51	4.0	6.0
4	吴胜兰	暨南大学附属第一医院消化内科	8	20	3.0	4.0
5	王旷靖	暨南大学附属第一医院消化内科	10	33	3.0	5.0
6	张良鹏	暨南大学附属第一医院消化内科	6	17	3.0	3.0