新生大鼠脊髓运动神经元的纯化培养与鉴定

• 作者: 刘阳 吕德成 杨林
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 运动神经元 免疫化学 纯化培养 新生大鼠 辽宁省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（42）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 6782-6786
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 6525字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.42.011

摘要

背景：神经元是有丝分裂后的细胞，体外培养很难存活。脊髓运动神经元的分离、纯化和培养同时也是细胞培养的技术难点。目的：建立新生大鼠脊髓运动神经元培养体系，并予以分类鉴定和测定其纯度。方法：取新生大鼠脊髓腹侧组织分离成细胞悬液，经密度梯度离心及差速贴壁后纯化培养，采用免疫细胞化学双标染色法对培养盖片上的细胞予以鉴定、分类，结合Hoechst荧光染核，计数各细胞成分的含量。结果与结论：细胞贴壁生长良好，神经元占85.8%，其中运动神经元达71.6%，星形胶质细胞占7.8%，NF200和胶质纤维酸性蛋白染色皆为阴性的细胞占6.4%。结果说明，取新生大鼠腹侧脊髓组织结合密度梯度离心及差速贴壁接种法可以培养出高纯度的脊髓运动神经元。