杂合抗菌肽MgJ基因在毕赤酵母中表达条件的优化

• 作者: 尹佳
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 杂合抗菌肽MgJ 毕赤酵母 表达条件优化
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 162-166
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201511031

摘要

为确定杂合抗菌肽Mg基因的最佳诱导表达条件,将构建好的重组表达载体pPICZαA-MgJ经Sac Ⅰ线性化处理,电转入巴斯德毕赤酵母GS115,利用抗生素Zeocin筛选阳性克隆,聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)扩增验证,甲醇诱导表达.优化杂合抗菌肽MgJ诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度、初始菌体浓度表达条件.结果表明杂合抗菌肽MgJ的最佳表达条件为:28℃、250 r/min诱导培养,每24 h添加体积分数0.5％的甲醇,诱导时间120 h,MgJ表达量可达11.9 mg/L.纯化后获得的表达产物MgJ对Saureus ATCC 29213有较好的抑菌活性,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)为10 μg/mL.