膝沟藻毒素GTX 2,3完全抗原的合成与鉴定

• 作者: 张锐 欧小蕾 章超桦
• 来源期刊: 食品工业
• 关键词: 膝沟藻毒素GTX 2,3 人工抗原制备 鉴定 免疫原性
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 工艺技术
• 页码范围: 129-133
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

膝沟藻毒素GTX 2,3是一类小分子物质,不具备免疫原性,欲制备其免疫血清及抗体,则必须与偶联剂及载体蛋白偶联形成完全抗原.运用乙二醛作为偶联剂,分别与牛血清白蛋白(BSA)、血蓝蛋白(KLH)合成免疫抗原GTX 2,3-glyoxal-BSA和检测抗原GTX2,3-glyoxal-KLH,并对经超滤纯化浓缩后的偶联产物进行BCA蛋白浓度测定、全波段紫外扫描、变形SDS-PAGE凝胶电泳和抗原免疫原性的鉴定.结果表明,免疫抗原和检测抗原的蛋白质量浓度分别为8.52 mg/mL和5.72 mg/mL;经全波段紫外扫描和变形SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,半抗原GTX 2,3-乙二醛与载体蛋白BSA、KLH偶联成功,偶联比约为1:16和1:20,并制备出纯度较高的免疫抗原;用制备的人工抗原GTX2,3-glyoxal-BSA对BaIb/C小鼠进行免疫,通过间接ELISA检测6免后小鼠血清效价达到1:20 000.成功制备了具有较强免疫原性的膝沟藻毒素GTX 2,3人工抗原.