CBM2蛋白的高密度自诱导

• 作者: 刘亚娟 刘亮伟 刘猛 韩来闯 马闪闪
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: CBM2 高密度 自诱导
• 年，卷（期）: 2015,（18）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 140-145
• 分类号: Q556
• 语种: 中文

摘要

为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3) E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果.ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTGLB培养基菌体的4.4倍.SDS-PAGE显示200 μL ZYM-5052菌体细胞含有82.3 μg CBM2,占细胞总蛋白55.3％;等量IPTG LB菌体细胞含有16.6 μg CBM2,占细胞总蛋白25.7％.取不同培养时间等量等同OD600的ZYM-5052菌体进行SDS-PAGE,结果显示单位细胞中蛋白量随着培养时间而增加.所以高密度自诱导不仅提高了细胞生长密度、而且提高了单位细胞中蛋白表达量.自诱导方案用于表达葡聚糖酶,与IPTG LB菌体相比,自诱导菌体OD600是其2.3倍,酶活性是其4.5倍.该研究为提高外源蛋白表达量提供了较为简单、普适的高密度自诱导方案.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘亮伟	河南农业大学生命科学学院	36	241	9.0	14.0
2	马闪闪	河南农业大学生命科学学院	3	14	2.0	3.0
3	刘猛	河南农业大学生命科学学院	7	25	4.0	5.0
4	刘亚娟	河南农业大学生命科学学院	5	20	3.0	4.0
5	韩来闯	河南农业大学生命科学学院	2	14	2.0	2.0