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摘要:
目的 观察在人胶质瘤细胞中微小RNA(miRNA,miR)-3175通过3'端非编码区(3'-UTR)对同源异形盒基因家族成员B1(HOXB1)表达的调控作用.方法 通过生物信息学可见miR-3175与HOXB1基因3'-UTR相互配对,构建HOXB1基因3'-UTR野生型和变异型荧光素酶载体,生物合成miR-3175 mimics、miR-3175 inhibitor和各自阴性对照.采用Lipofectamine 2000转染和双荧光素酶报告基因系统检测人胶质瘤细胞株(A172、U87)中miR-3175对HOXB1基因3'-UTR的调控作用.寡核苷酸转染24、48、72 h后,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot分析miR-3175在人胶质瘤细胞株(A172、U251、U87)对HOXB1基因的表达调控.结果 双荧光素酶报告基因系统提示共转染HOXB1基因野生型载体和miR-3175 mimics后荧光素酶活性明显下降(P<0.05),A172细胞株荧光素酶活性下降(37.38±10.98)%,U87细胞株荧光索酶活性下降(24.62±3.22)%.与对照组比较miR-3175 mimics可下调HOXB1基因的表达,转染72h后HOXB1 mRNA表达水平在A172细胞株中下降(42.57±5.52)%,U251细胞株中下降(71.06±0.41)%,U87细胞株中下降(55.54±7.57)%;miR-3175 inhibitor可上调HOXB1基因的表达,转染72 h后HOXB1 mRNA表达水平在A172细胞株中升高(92.39±31.88)%,U251细胞株中升高(250.25±60.37)%,U87细胞株中升高(128.44±25.11)%.转染后HOXB1蛋白水平的变化也得出了相类似的结果.结论 HOXB1基因3'-UTR为miR-3175调控直接靶点,并且miR-3175 mimics为靶向负调控,miR-3175 inhibitor为靶向正调控.
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文献信息
篇名 人胶质瘤细胞中微小RNA-3175对同源异形盒基因家族成员B1基因表达的调控作用
来源期刊 中华实验外科杂志 学科
关键词 胶质瘤 同源异形盒基因家族成员B1 微小RNA-3175
年,卷(期) 2015,(9) 所属期刊栏目 神经外科
研究方向 页码范围 2064-2067
页数 4页 分类号
字数 3468字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.09.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 田宇 吉林大学中日联谊医院神经外科 132 469 11.0 14.0
2 周海霞 吉林大学中日联谊医院VIP病房 9 22 3.0 4.0
3 田男 浙江中医药大学生命科学学院 25 33 3.0 4.0
4 韩亮 吉林大学中日联谊医院神经外科 23 58 4.0 6.0
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研究主题发展历程
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胶质瘤
同源异形盒基因家族成员B1
微小RNA-3175
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华实验外科杂志
月刊
1001-9030
42-1213/R
大16开
武汉市东湖路165号
38-85
1984
chi
出版文献量(篇)
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