脂肪源性干细胞体外分离培养及向内皮祖细胞的诱导分化

• 作者: 万有栋 刘子琪 姚瑞 孙同文 阚全程
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脂肪干细胞 内皮祖细胞 脂肪源性干细胞 组织块培养法 分离 培养 诱导 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（32）
• 所属期刊栏目: 研究与报 -- 脂肪干细胞
• 页码范围: 5182-5187
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.32.018

摘要

背景：脂肪源性干细胞是目前组织工程种子细胞的研究热点，通常采用胶原酶消化脂肪组织来获得，但是存在着操作繁琐，花费高等不足。<br>　　目的：观察组织块培养法分离的脂肪源性干细胞的基本生物学特性及其向骨细胞、脂肪细胞及内皮祖细胞的诱导分化潜能。<br>　　方法：无菌条件下切取大鼠双侧腹股沟脂肪组织，组织块法分离培养脂肪源性干细胞，CCK-8法检测细胞增殖活性，流式细胞仪分析干细胞表面标志表达。取第4代脂肪源性干细胞用成骨诱导液、成脂诱导液、内皮祖细胞诱导液培养两三周并进行鉴定。<br>　　结果与结论：组织块培养法得到的脂肪源性干细胞易扩增，传代后以长梭形细胞生长为主，呈漩涡状排列，克隆样生长；经多次传代仍能保持较强的增殖能力，细胞生长曲线呈抛物线形；细胞表面标志CD44、CD90、CD29呈阳性表达，CD45、CD31呈阴性表达。成脂诱导后细胞油红O染色阳性、成骨诱导后细胞茜素红染色阳性。诱导后的内皮祖细胞CD34及DiI-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色阳性。以上结果显示组织块培养法能成功分离培养出脂肪源性干细胞，且获得的细胞纯度较高、易于增殖培养，能高表达干细胞表面抗原以及具有向骨细胞、脂肪细胞及内皮祖细胞多向分化的潜能，可以满足组织工程研究种子细胞的需求。