雷帕霉素处理对人胶质瘤细胞微小RNA-143表达的影响

• 作者: 代荣钦 冯凌霄 刘卫青 张慧峰 秦秉玉 程剑剑 邵换璋 郭志松
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 雷帕霉素 神经胶质瘤 微小RNA-143
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 2722-2724
• 页数: 3页
• 字数: 3272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.11.029

摘要

目的 采用人胶质瘤细胞U251与CHG-5进行观察,探讨在雷帕霉素的处理下,其微小RNA(miRNA,miR)-143的表达.方法 以对人胶质瘤U251与CHG-5细胞培养,加入100 mmol/L雷帕霉素培养,收集细胞加入氯仿(140μl),连续2次洗柱处理,溶解RNA,去除基因组DNA,miRNA-PolyA标记与反转录(RT)反应,运用miRNA-定量聚合酶链反应(PCR)检测,观察未处理以及处理后6、12、24h后,U251与CHG-5细胞miR-143表达.结果 人胶质瘤U251细胞中未处理时miR-143表达为1.00,处理6h后表达为1.16,处理12 h后表达为3.55,处理24h表达为12.64;人胶质瘤CHG-5细胞中未处理时miR-143表达为0.11,处理6h后表达为0.28,处理12 h后表达为0.86,处理24 h表达为1.00;人胶质瘤U251与CHG-5细胞均表现为随着雷帕霉素处理时间的延长,miR-143表达水平逐渐上调,与未处理比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 经雷帕霉素处理后,可对磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的活性造成抑制,增加miR-143表达.