核糖核酸干扰基质金属蛋白酶-3基因对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

• 作者: 冯艳 宋昆鹏 张晶晶 李艳 石海莉 韩凌 黄捷
• 来源期刊: 中国循环杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基质金属蛋白酶-3 血管平滑肌细胞 RNA干扰 增殖
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 159-163
• 页数: 5页
• 分类号: R541
• 字数: 3774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3614.2015.02.016

摘要

目的：研究靶向大鼠基质金属蛋白酶-3基因的小干扰核糖核酸（siRNA）对血管平滑肌细胞增殖的影响。 <br>　　方法：构建靶向自发性高血压大鼠基质金属蛋白酶-3（MMP-3）的三对核糖核酸（RNA）干扰序列。将体外培养的血管平滑肌细胞随机分为对照组、Lipofectamine 2000（转染试剂）组、MMP-3-siRNA-1组、MMP-3-siRNA-2组、MMP-3-siRNA-3组，以Lipofectamine 2000分别转染血管平滑肌细胞，48 h后，以实时定量聚合酶链反应（PCR）检测血管平滑肌细胞MMP-3信使核糖核酸（mRNA）的表达水平，筛选干扰效率最高的siRNA作为实验对象。血管平滑肌细胞随机分为4组：对照组、血小板源生长因子（PDGF）组、Lipofectamine 2000+PDGF组及MMP-3-siRNA-1+PDGF组；用siRNA转染体外培养的血管平滑肌细胞，以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测血管平滑肌细胞增殖。 <br>　　结果：实时定量PCR显示，三对互补干扰片段均有不同程度的干扰效果，与对照组比较，MMP-3-siRNA-1组、MMP-3-siRNA-2组和MMP-3-siRNA-3组的mRNA水平明显降低，分别降低了81%、64%和22%。以MMP-3-siRNA-1组的干扰效率最高。蛋白免疫印迹法分析结果亦显示MMP-3-siRNA-1组的干扰效率最高。四甲基偶氮唑盐比色法检测吸光度值结果显示，与PDGF组相比，MMP-3-siRNA-1+PDGF组转染能显著降低PDGF诱导血管平滑肌细胞增殖的吸光度值，抑制率为36.1％（P<0.05），差异有统计学意义。 <br>　　结论：靶向MMP-3基因siRNA序列，能显著降低平滑肌细胞MMP-3 mRNA和蛋白水平，抑制细胞增殖。靶向MMP-3基因干扰RNA可能成为血管增殖性疾病治疗的新靶点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李艳	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	119	497	12.0	16.0
2	黄捷	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	14	13	2.0	3.0
3	宋昆鹏	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	15	16	3.0	3.0
4	冯艳	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	23	81	5.0	8.0
5	韩凌	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	8	20	4.0	4.0
6	张晶晶	郑州大学附属郑州中心医院心血管内科	32	133	7.0	10.0
7	石海莉		1	4	1.0	1.0