人参皂苷Rg1对心肌细胞的影响及其信号传导机制

• 作者: 凌露 刘燃 孙林 宋蕊 张戈 杨萍 袁丽 郭家智 陆地
• 来源期刊: 中国循环杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人参皂苷Rg1 磷脂酰肌醇3激酶 缺氧诱导因子-1α 内质网应激 凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 1096-1100
• 页数: 5页
• 分类号: R54
• 字数: 4807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3614.2015.11.015

摘要

目的：从细胞和分子层面探讨人参皂苷Rg1（G-Rg1）对心肌细胞的影响及其信号传导机制。<br>　　方法：体外培养大鼠H9c2心肌细胞，按实验要求随机分13组，每组5个平行孔，分别为空白对照组，单纯缺血缺氧2 h、6 h、12 h、24 h、48 h组，G-Rg15μmol/L、10μmol/L、50μmol/L组，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的特异性抑制剂（YC-1）组，YC-1+G-Rg1组，蛋白激酶B（Akt）蛋白的磷酸化特异性抑制剂（Wortmannin）组， Wortmannin+G-Rg1组。检测G-Rg1、缺血缺氧以及YC-1对心肌细胞活力及心肌细胞损伤的影响。同时用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测心肌细胞内HIF-1α、葡萄糖载体蛋白-1（GLUT-1）和血红素氧合酶-1（HO-1）的信使核糖核酸mRNA表达水平变化。用蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α、GLUT-1和HO-1、活化转录因子-6（ATF-6）、抑制CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）和Akt等细胞信号通路蛋白表达水平变化。<br>　　结果：缺血缺氧时间与心肌细胞活力呈负相关（r=-0.8580，P<0.05），与乳酸脱氢酶溢出率呈正相关（r=0.9201， P<0.05）。G-Rg110μmol/L组较单纯缺血缺氧24 h组细胞活力明显回升（87.8%、62.6%，P<0.05），细胞培养上清乳酸脱氢酶（LDH）含量明显减少（25.0%、74.8%，P<0.05），且上调了HIF-1α、GLUT-1、HO-1的mRNA表达水平（P<0.05）。蛋白质免疫印迹法分析显示：YC-1+G-Rg1组较G-Rg1组，心肌细胞活力下降（68.0%，87.8%，P<0.05），细胞培养上清LDH含量增加（56.4%，25.0%，P<0.05），同时YC-1拮抗了G-Rg1对HIF-1α、GLUT-1、HO-1、ATF-6和CHOP的蛋白表达水平的调控（P<0.05）；Wortmannin可拮抗G-Rg1对HIF-1α和CHOP的蛋白表达水平的调控（P<0.05），及对Akt两个磷酸化位点的激活作用（P<0.05）。<br>　　结论：心肌细胞损伤程度与缺血缺氧时间有关；G-Rg1对心肌细胞具有保护作用，其机制激活HIF-1α及其下游因子的表达并抑制了内质网应激效应，可能与G-Rg1激活Akt有关。