Ei sh单纯疱疹病毒1型ICP34.5在Vero细胞的表达及对Bax/Bcl-2的影响

• 作者: 张怀宏 翟玉峰 范崇桂 闪海霞 霍丽亚
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒1型 ICP34.5 Vero Bax Bcl-2
• 年，卷（期）: 2015,（21）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 3969-3972
• 分类号: R117
• 语种: 中文

摘要

目的 构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)真核表达载体pmR-mcherry-ICP34.5,验证ICP34.5对宿主细胞Bax、Bcl-2 mRNA相对表达量及对Bax/Bcl-2的影响.方法 以提取HSV-1病毒DNA为模版,PCR扩增HSV-1 ICP34.5序列,双酶切连接至pmR-mcherry真核表达载体上,并对重组真核表达载体进行验证,然后重组载体瞬时转染Vero细胞,mRNA水平表达用逆转录PCR方法检测,融合蛋白的表达的检测用荧光显微镜,MTT检测对Vero的细胞活性,喜树碱诱导凋亡后,实时定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA在细胞中的相对表达量.结果 转染后RT-PCR验证有目的基因的转录,荧光显微镜观察到融合蛋白在转染的Vero细胞中表达.重组质粒可以抵消空质粒对细胞的损伤作用,转染重组质粒的Vero细胞和正常细胞的中Bax mRNA表达量和Bcl-2 mRNA表达量相差不大,但Bax/Bcl-2得比值明显低于转染pmR-mcherry空质粒的Vero细胞和正常加药的Vero细胞.结论 pmR-mcherry-ICP34.5真核表达载体能在Vero细胞中高效表达,并能减弱空质粒转染对细胞活性作用,ICP34.5能使Vero细胞中Bax/Bcl-2稳定性增强,使细胞抗凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	霍丽亚	河南省南阳市中心医院感染性疾病科	10	54	4.0	7.0
2	翟玉峰	河南省南阳市中心医院感染性疾病科	19	75	5.0	7.0
3	张怀宏	河南省南阳市中心医院感染性疾病科	15	65	5.0	7.0
4	范崇桂	河南省南阳市中心医院感染性疾病科	6	20	3.0	4.0
5	闪海霞	河南省南阳市中心医院感染性疾病科	6	23	3.0	4.0