牛胰脏组织蛋白酶L的纯化和酶学性质

• 作者: 刘世欣 刘森轩 崔保威 崔昱清 彭增起 李君珂 王复龙 郭秀云
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 组织蛋白酶L 牛胰脏 纯化 酶学特性
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 142-146
• 页数: 5页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 3726字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201515026

摘要

新鲜牛胰脏匀浆物经酸化粗提后,再通过盐析、柱层析等步骤纯化,制备了0.58 mg纯酶,纯化倍数达530.54.经凝胶电泳分析,该酶有2个亚基,分子质量为29.1 kD和18.9 kD.牛胰脏组织蛋白酶L的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为6.5.巯基还原剂二硫苏糖醇、L-半胱氨酸均明显激活了该酶活性,10 μmol/L的N-(反式-环氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺(E-64)可完全抑制其活性.1mmol/L的Zn2+对酶活性有明显抑制作用.该纯化酶可水解苄氧羰基-苯丙氨酰-精氨酰-甲基香豆素(Z-Phe-Arg-MCA),其Km值为3.52 μmol/L.