草酸钙晶体刺激下人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1的表达

• 作者: 吴博 奉有才 王翔 邓耀良 陶芝伟 黄鹏 黎承杨
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 高迁移率族B1 一水草酸钙 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 1712-1716
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.11.014

摘要

背景：研究发现在肾结石模型中肾间质晶体周围存在大量单核/巨噬细胞浸润，显示巨噬细胞可能参与晶体在肾脏中的沉积过程，而巨噬细胞是人体重要的固有免疫细胞，在肾脏中沉积的大量的单核/巨噬细胞吞噬晶体，会产生一些炎症因子损伤和破坏肾小管上皮细胞，最终有利于结石的形成。目的：探讨一水草酸钙晶体刺激人巨噬细胞后高迁移率族蛋白B1的表达水平。方法：用100 mg/L的一水草酸钙刺激巨噬细胞，分别于刺激后0，6，12，24和36 h，用Western blot检测细胞总蛋白和细胞浆内高迁移率族蛋白B1的含量；用实时荧光定量PCR，检测细胞中高迁移率族蛋白B1 mRNA表达情况；分别于一水草酸钙刺激后0，1，2和4 h，用酶联免疫吸附实验测定细胞培养液上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的水平。结果与结论：一水草酸钙刺激后0-6 h细胞浆内高迁移率族蛋白B1的含量较低，刺激后12-36 h细胞浆内高迁移率族蛋白B1逐渐增加。一水草酸钙刺激后0-6 h，巨噬细胞总蛋白中高迁移率族蛋白B1含量不高，在刺激后12 h细胞总蛋白高迁移率族蛋白B1的含量开始增加，并且在刺激后24-36 h保持在较高水平。RT-PCR结果显示，一水草酸钙刺激后0-12 h，培养细胞中高迁移率族蛋白B1的mRNA表达量无明显变化，刺激后18-24 h培养细胞中高迁移率族蛋白B1的mRNA表达量明显增加。ELISA结果显示，一水草酸钙刺激后2 h，细胞培养液上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达和释放增加，4 h达到明显高峰。结果表明，一水草酸钙可以诱导人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1的表达及mRNA表达增加；诱导人巨噬细胞内肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达增加，且高迁移率族蛋白B1表达的时间明显晚于肿瘤坏死因子a和白细胞介素6的释放时间。