特异性逆转录microRNA-505的高效茎环引物的设计

• 作者: 仝莉 周宇荀 李凯 熊黎 王茂春 肖君华
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 茎环引物 miR-505 逆转录 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)
• 年，卷（期）: 2015,（27）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5225-5229
• 分类号: Q95-3|Q75
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2015.27.007

摘要

目的:构建一个高效且特异性的逆转录茎环引物,以准确定量检测小鼠的miRNA-505基因,同时探讨茎环引物的结构对逆转录效率的影响.方法:规律性地改变通用茎环引物的茎部和环部的碱基结构,再进行不同的组合,利用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术,探寻效率最高的茎环引物.结果:当固定茎部结构为14对碱基,规律性改变环部碱基个数(15,18,21),经RT-PCR检测的CT值无差异,均为28.5;当固定环部结构为21个碱基,CT值随茎部碱基对(8,11,14)规律性地延长而逐渐增大;当环部结构为21个碱基,茎部结构为8对碱基时CT值最小,为26.7.结论:环部结构对茎环引物的效率无贡献;当环部结构为21个碱基,茎部结构为8对碱基时,茎环引物的效率和特异性是最佳的,适用于准确检测小家鼠的miRNA-505基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖君华	东华大学生物科学与技术研究所	58	137	7.0	9.0
2	李凯	东华大学生物科学与技术研究所	58	122	6.0	9.0
3	周宇荀	东华大学生物科学与技术研究所	53	102	6.0	9.0
4	熊黎	东华大学生物科学与技术研究所	1	0	0.0	0.0
5	仝莉	东华大学生物科学与技术研究所	3	2	1.0	1.0
6	王茂春	东华大学生物科学与技术研究所	6	0	0.0	0.0