磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70负载转化生长因子β1AS-ODN转染心肌细胞

• 作者: 张卓琦 张敏 徐建荣 曹希传 杨煜 林雪烽 王志荣 赵侠
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 磷酸胆碱聚合物 MPC30-DEA70 转化生长因子β1 反义寡核苷酸 细胞转染 心肌细胞 基因治疗 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（33）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5332-5337
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.33.017

摘要

背景：目前反义寡核苷酸的基因治疗已经拥有良好的应用前景，但是反义寡核苷酸的相对分子质量小却不容易入细胞并且易被核酸酶降解，能否有效地穿过细胞膜且不被核酸酶降解从而与目的基因结合发挥作用，因此人们一直致力于理想载体的选择、基因转移效率的增加和转移特异性等研究。目的：探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物 MPC30-DEA70能否有效地负载转化生长因子β1反义寡核苷酸(AS-ODN)进入心肌细胞，并观察其对该基因胞内生物表达的影响。方法：按不同N/P电荷比值将载体MPC30-DEA70与转化生长因子β1 AS-ODN络合成形成基因复合物并且对其总电性进行表征；采用MTT法检测MPC30-DEA70与心肌细胞的生物相容性；共聚焦激光扫描显微镜观察MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN 在细胞内的分布和定位；应用流式细胞仪检测 MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN(FAM标记)的细胞转染效率和荧光强度；Western blot、RT-PCR法检测转化生长因子β1细胞内表达水平。结果与结论：MPC30-DEA70与心肌细胞具有较好的细胞相容性，在较高质量浓度(>20 mg/L)下才表现出一定的细胞毒性并呈剂量依赖；MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN 复合物对心肌细胞具有较高的转染效率，并且能够携带转化生长因子β1 AS-ODN进入细胞后下调转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达。新型阳离子磷酸胆碱基聚合物MPC30-DEA70可以有效负载和运输转化生长因子。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志荣	徐州医学院附属医院心内科	108	385	11.0	15.0
2	曹希传	中国矿业大学材料科学与工程学院	12	25	3.0	4.0
3	杨煜	徐州医学院附属医院心内科	39	107	5.0	7.0
4	徐建荣	徐州医学院附属医院心内科	5	2	1.0	1.0
5	林雪烽	徐州医学院附属医院心内科	5	2	1.0	1.0
6	张敏	徐州医学院附属医院心内科	20	13	2.0	3.0
7	赵侠	徐州医学院附属医院心内科	4	0	0.0	0.0