腺相关病毒介导β-神经生长因子基因转染内皮祖细胞

• 作者: 吴东进 彭长亮 杨中雁 高春正
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 神经生长因子 内皮祖细胞 基因转染 细胞培养 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（36）
• 所属期刊栏目: 循证医学杨 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 5853-5858
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.36.021

摘要

背景：基因疗法为许多难治性疾病的治疗带来了新思路，选择合适的细胞、基因及载体是基因治疗的关键。目的：利用重组腺相关病毒载体介导β-神经生长因子基因转染大鼠骨髓源内皮祖细胞，观察目的基因β-神经生长因子的表达情况及对内皮祖细胞增殖的影响。<br>　　方法：分离、培养、鉴定大鼠骨髓源内皮祖细胞，使用携带β-神经生长因子基因的重组腺相关病毒(rAAV-GFP-β-NGF)转染内皮祖细胞，根据绿色荧光蛋白荧光表达情况检测转染效率。利用 ELISA法在蛋白水平检测β-神经生长因子的表达情况，MTT法检测目的基因对内皮祖细胞增殖活性的影响。<br>　　结果与结论：成功从大鼠骨髓中分离培养出内皮祖细胞，经鉴定符合内皮祖细胞特征。β-神经生长因子基因成功转染内皮祖细胞，转染率为65.3%。基因转染组细胞培养上清中检测到β-神经生长因子蛋白的表达，且可持续10 d，空白组和空载病毒转染组未检测到β-神经生长因子的表达。重腺相关病毒转染后内皮祖细胞增殖活性增高，与空载病毒转染组和空白组相比差异有显著性意义(P<0.05)，空白组和空载病毒转染组之间增殖活性差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明，经重组腺相关病毒介导可成功将β-神经生长因子基因转染入大鼠骨髓源内皮祖细胞，使其持续表达β-神经生长因子蛋白并促进内皮祖细胞增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高春正		16	41	4.0	6.0
2	吴东进		9	18	2.0	4.0
3	杨中雁		1	1	1.0	1.0
4	彭长亮		5	4	1.0	1.0