骨膜细胞与髓核细胞共培养向成骨方向的分化

• 作者: 张峻伟 李智多 杨宇明 盛晓磊 袁峰 陆海涛
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 骨细胞 髓核细胞 骨膜细胞 共培养 成骨分化 增殖 分化 黏附 骨形态发生蛋白7 组织工程
• 年，卷（期）: 2015,（37）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨组织构建
• 页码范围: 5916-5922
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 7987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.37.003

摘要

背景：骨膜细胞已被应用于骨缺损及修复，但其可否在成骨诱导环境中与髓核细胞共培养向成骨分化，并应用于椎间隙骨性融合的相关研究报道较少。<br>　　目的：分离培养髓核细胞与骨膜细胞，观察特定环境下髓核细胞的成骨潜能，以及加入骨膜细胞与其共培养后的成骨能力。<br>　　方法：Ⅱ型胶原酶消化离心贴壁法分离兔髓核细胞；组织贴壁培养法分离兔骨膜细胞。采用细胞表面抗原CD90、CD105免疫荧光染色法鉴定骨膜细胞，甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学鉴定髓核细胞。实验分为两组：成骨诱导环境单独培养的髓核细胞为对照组，加入骨膜细胞与髓核细胞共培养为实验组。CCK8法检测细胞增殖，分别行碱性磷酸酶、茜素红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色进行成骨鉴定，Western blot检测两组细胞成骨诱导后骨桥蛋白的表达。<br>　　结果与结论：骨膜细胞表面抗原CD90、CD105呈阳性，髓核细胞甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色阳性；1，3，5，7，9 d各时间点实验组髓核细胞增殖活性显著高于对照组；诱导2周后2组细胞碱性磷酸酶染色、茜素红染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色均为阳性，但实验组阳性表达高于对照组(P<0.05)；实验组骨桥蛋白表达强于对照组。髓核细胞具有成骨分化的潜能，但体外的增殖能力较低，加入骨膜细胞后，共培养细胞增殖分化能力提高。成骨诱导下骨膜细胞与髓核细胞共培养具有良好相容性，细胞相互黏附，并具有强于单独诱导髓核细胞的成骨能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁峰		80	375	11.0	16.0
2	杨宇明	徐州医学院研究生学院	4	23	3.0	4.0
3	陆海涛	徐州医学院研究生学院	4	23	3.0	4.0
4	张峻伟	徐州医学院研究生学院	1	3	1.0	1.0
5	盛晓磊	徐州医学院研究生学院	2	16	2.0	2.0
6	李智多	徐州医学院研究生学院	2	16	2.0	2.0